总说驱虫，你认真观察分析过马便便吗？

随着马业的发展，越来越多的马主开始认识到驱虫的必要性。市场上，各式各样的驱虫药琳琅满目，但问题也随之而来。什么时候驱虫？用什么驱虫药？给多大剂量？驱虫后马匹体内就没有虫了吗……一系列问题接踵而至。

回到问题的根本，驱虫的目的是什么？

驱虫的真正目的是对寄生虫的流行传播进行控制，限制寄生虫病的发展，保证马匹健康，而并不是以根除马匹体内全部寄生虫为目的。且在驱虫过程中，若采用不适宜的驱虫方法，以及大量、不合理的使用驱虫药物会不可避免的促使马匹体内的寄生虫产生耐药性，对后续的治疗及防控造成不利影响。因此，总结而言，驱虫的目的是：

降低寄生虫病流行风险

降低马匹排出虫卵的可能

维持驱虫药物的有效性，避免耐药性进一步发展的可能

耐药性是怎么产生的？

寄生虫的耐药性指用一般有效剂量治疗某种寄生虫病时，虫体抵抗药物治疗的能力。在长期的高强度药物压力环境下，虫体可获得针对相应结构药物的耐药基因，并通过繁殖，将耐药基因世世代代地传递下去。若不能及时纠正使用针对性更强的驱虫药物或选择合理的药物剂量，制定更有效的驱虫方案，耐药性问题则会越来越严重。

在驱虫前应进行那些检测？

为了更好的了解马匹体内存在的寄生虫的种类及感染程度，一方面，我们可以通过马匹的临床表现和清晰明确的驱虫史进行初步的判断；另一方面，可以在兽医的帮助下进行粪便虫卵观察与计数，更为直观的反应马匹的健康状况。

进行粪便虫卵检测的目的：

对最近一次驱虫后的粪便虫卵重现期进行评估及监测；

对所采集粪便中马匹排出虫卵的量及状态进行监测；

通过粪便虫卵减少实验，评估驱虫药物的有效性；

最后，对马驹及新生幼驹，可通过检测，判知其体内感染的寄生虫是副蛔虫还是线虫。

如何对马匹的粪便进行虫卵检测?

方法一：直接涂片法

用牙签或小镊子挑取少量粪便于滴有生理盐水的载玻片上；

混匀，夹去较大或较多的粪渣，保证载玻片上的粪液均匀分布，将此载玻片置于报纸上，能够通过粪液辨认其下字迹为宜；

自一端轻轻盖上盖玻片，避免产生气泡；

置微镜下观察。

方法二：漂浮法

漂浮法是比较常用的粪便虫卵观察的方法，常用的溶液有：饱和的硝酸钠、硫酸锌、盐水以及蔗糖。目前临床常用饱和盐水漂浮法来进行虫卵的漂浮计数，但最新的研究表明，饱和硝酸钠较饱和盐水可更好的漂浮线虫卵、线虫幼虫、绦虫卵、鞭毛虫的包囊以及球虫卵囊，因此建议采用饱和硝酸钠溶液作为进行漂浮法检测的首选溶液。

取至少2~4g粪便，至于干净的容器内用少量的饱和硝酸钠溶液充分混合均匀；

随后将混匀后的粪液过筛或双层纱布，以去除大块粪渣；

将过滤后的滤液置于一小口径量桶或试管内（口径应小于载玻片宽度），可用少量饱和硝酸钠溶液再次对过滤后的粪渣进行虫卵漂浮及过滤；

收集全部滤液，并加入饱和硝酸钠溶液至液面略高于管口，但不溢出为止；

取一干净载玻片，至于量筒或试管口，静置10min左右后，将载玻片提起并迅速翻转；

置显微镜下观察。

方法三：粪便培养法

目前，对于大多数马场，感染马匹最常见的寄生虫就是线虫，且多为小圆线虫类。目前，共发现40多种线虫可感染马匹，并且它们的卵在显微镜下十分相似，很难区分。有时为了区分这些线虫卵的种类，常将含有虫卵的粪便加以培养，待其中虫卵发育成为第三期幼虫时，再对幼虫进行检查，根据幼虫形态上的差异，加以鉴别。

取5~10g新鲜的粪便样本与等量蛭石混匀呈一球状；

将混匀后的粪球置于两层纱布内，上方系紧并留一个固定绳以固定纱布袋；

在适宜的容器内内放入一定量的清水，将纱布袋贴近水面固定于水面上方；

置于阴暗室温环境中孵育10到12天；

10~12天后，取出容器内液体，置于一次性平皿中，经显微镜观察。

方法四：沉淀法

沉淀法主要用于粪便中比重较大的虫卵的分离与观察，例如:吸虫卵。一般采用自然沉淀法或离心沉淀法进行沉淀。

取2~4g粪便样本置于样本杯中，用40ml左右清水混匀；

将混匀的粪液过筛或双层纱布，并收集滤液于50ml离心管或一新的样品杯中，静置5min左右，吸弃上清；

用40ml 1：500稀释的洗涤灵水重复混匀过滤步骤（使用一般洗涤灵即可）；

用清水对上一步沉淀进行洗涤过滤，再次静置5min后，取下层沉淀，置于载玻片上；

置显微镜下观察。

方法五：贝尔曼氏法

用于从组织或粪便中培养、分离线虫的第三期幼虫。或从被剖检动物的某些组织中分离活的幼虫。

用一小段乳胶管两端分别连接漏斗和小试管，然后置漏斗架上，并用夹子夹住乳胶管；

在漏斗内铺两层纱布用以支撑粪便或组织样本；

向漏斗内加入40℃温水至漏斗中部，并放置被检材料（粪便或组织），静置2小时或者过夜；

孵育过程中，大部分幼虫游走沉于漏斗下部，此时松开夹子，收集孵育后的滤液于小试管内；

用吸管吸取下层滤液进行镜检观察，有时也可直接目测到鞭打性游动的幼虫或较小的成虫。

利用贝尔曼氏法进行幼虫孵育时，漏斗内纱布铺设示意图


方法六：胶带法

蛲虫虫卵多位于马匹尾根、肛门及会阴周围区域。因此，采用粪便虫卵检测多产生假阴性结果。对于这种情况，建议使用胶带法，直接粘取马匹尾根、肛门及阴门附近区域的皮肤碎屑，至显微镜下镜鉴，必要时可进行染色观察。

可通过粪检看到的寄生虫虫卵有哪些？都长什么样？

目前，通过粪检，可较为直观的观察到线虫卵、蛔虫卵、绦虫卵以及吸虫卵。

圆线虫虫卵               


尖尾线虫虫卵（88×42μm）


马副蛔虫虫卵（88×77μm）


肺线虫虫卵（92×58μm）  


叶状裸头绦虫虫卵（72μm）                          


肝片吸虫虫卵（134×66μm）


如何才知道马匹体内寄生虫是否具有耐药性？
      
在驱虫前及驱虫后10~14天后分别进行粪便虫卵计数，即粪便虫卵计数减少实验。通过检测结果有效评估马匹体内寄生虫对其针对性药
物的敏感性。粪便虫卵计数可采用麦克马斯特法，具体操作如下：

取4g新鲜粪便样品于样品杯中，加入30ml饱和硝酸钠溶液，充分混匀；

将粪便混匀液过筛或单层纱布，移至另一干净的样品杯中；

取上层滤液至麦氏计数板内（每一计数板有两个计数室，每一计数室内容量为0.15ml）静置10min左右；

显微镜下计数，计数顺序：从上到下，从左到右。若两个计数室的计数结果偏差大于20%，则表明样品混合不均，应重新进行上述操作。

结果计算：
      
两计数室内同种虫卵数之和×25=每克粪便中所含某种虫卵的总数（0.15ml×2=0.3ml=1/100×30ml,而30ml粪便混匀液中含有4g粪便样本，因此计算方法为：两计数室内同种虫卵数之和×100÷4，即：两计数室内同种虫卵数之和×25=每克粪便中所含某种虫卵的总数）

粪便样品的采集及贮藏方法：

样品应储存在密封的离心管或塑料袋内；

采集的粪便样品应越新鲜越好(<12h)，采集后应尽快置冰箱或冰盒内保存运输；

冷藏是最常用的样本储存方式，也可在厌氧的条件下置室温保存，但对于较干燥的样本，建议冷藏；

采样后7天内应进行检测；

冻存后的样品不可用于检测；

腹泻样本不可用于定量检测，但可用于定性检测。



来源：中海生物